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pfeng00木蟲 (正式寫手)
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[求助]
DNA傳感器-多步反應(yīng),一個(gè)電極上依次完成各步反應(yīng)還是在不同電極上完成不同步驟的反應(yīng)
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我的實(shí)驗(yàn)是一個(gè)多步驟反應(yīng)，包括：1-自組裝，2-MCH鈍化，3-第一次雜交，4-第二次雜交，我想判斷步驟3和步驟4是否成功發(fā)生（即這兩步完成后電化學(xué)參數(shù)是否有變化），那么下面兩種做法哪種才是合理的呢？如果都不合理那么正確的做法是怎樣的？ 做法1：在一支電極上依次將這幾個(gè)步驟做完，每完成一個(gè)步驟測(cè)一次電化學(xué)參數(shù)，然后比較幾個(gè)不同步驟的參數(shù)的變化來(lái)評(píng)價(jià)整個(gè)電化學(xué)反應(yīng)。 做法2：用5支電極來(lái)做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，分別用以評(píng)價(jià)裸金電極的狀態(tài)、完成步驟1后自組裝的情況、完成步驟1和2后的電極狀態(tài)、完成步驟1-3后的電極狀態(tài)、完成步驟1-4后的電極狀態(tài)。 感覺電化學(xué)實(shí)驗(yàn)重復(fù)性很差，有時(shí)候幾支裸金電極電化學(xué)參數(shù)幾乎一樣的電極做同樣的反應(yīng)，到第一步或者第二步的時(shí)候差異都很大了，所以覺得做法2各電極表征的不同步驟完成后的電化學(xué)狀態(tài)沒有可比性。如果按做法1做，不知在電化學(xué)掃描或后續(xù)的反應(yīng)中是否會(huì)導(dǎo)致自組裝的DNA脫落從而影響后續(xù)結(jié)果，如果存在這種影響，影響有多嚴(yán)重？ [ Last edited by pfeng00 on 2012-8-18 at 18:20 ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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電化學(xué)傳感器本身就不穩(wěn)定，做著玩吧。 你的這種差異可以通過(guò)重復(fù)試驗(yàn)來(lái)分析結(jié)果，一次測(cè)量很難說(shuō)明問(wèn)題。 另外，你可以按照做法1 平行做3-5個(gè)電極，計(jì)算平均值，比較修飾、處理前后的電極變化； 或者多重復(fù)做法2，如果有想要的變化或趨勢(shì)，也是能夠說(shuō)明問(wèn)題的。 電化學(xué)傳感器修飾步驟越多，檢測(cè)步驟越多，誤差積累的就越多, 重復(fù)性、準(zhǔn)確性、可靠性都將會(huì)受到質(zhì)疑。你最后一句問(wèn)影響有多嚴(yán)重？ 如果檢測(cè)探針的量（我的理解）都不能保證，那么，又有多大的自信說(shuō)我的檢測(cè)結(jié)果很可靠呢。 |
2樓2012-08-30 16:14:46
Jackcd12
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4樓2013-03-15 11:46:28
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6樓2013-03-22 19:09:41
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