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自然_法則銀蟲 (初入文壇)
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核酸電泳圖
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圖中帶1，2是同一種PCR產(chǎn)物，3，4也是同一種PCR產(chǎn)物，5是Marker2000,6,7是質(zhì)粒的DNA 無(wú)果（沒有加RNA酶）8是Marker10000。 我用的染料是Ultra Power 25ml膠里加入2.5ul 染料。求解釋為什么條帶不整齊 越往上條帶越模糊 謝謝 核酸電泳圖PCR產(chǎn)物 |
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2樓2012-08-24 09:21:44
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3樓2012-08-24 09:47:15
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
自然_法則: 回帖置頂 2012-08-24 15:56:06
自然_法則: 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-08-27 11:53:46
自然_法則: 回帖置頂 2012-08-24 15:56:06
自然_法則: 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-08-27 11:53:46
| 首先是膠的配制問題，從跑的帶來(lái)看可能是由于配膠時(shí)各個(gè)原料沒有混合均勻，導(dǎo)致膠的疏密不均。第二可能跟膠有關(guān)，尤其瓊脂糖的質(zhì)量問題。第三是由于跑膠是的電壓?jiǎn)栴}，有的時(shí)候電壓過高會(huì)出現(xiàn)這種情況。再就是一個(gè)重要原因是緩沖液也就是電極液的問題，我在做試驗(yàn)的時(shí)候也出現(xiàn)過這種問題，主要是因?yàn)殡姌O液用的時(shí)間過長(zhǎng)或者是里面摻了很多雜質(zhì)。 |
4樓2012-08-24 10:51:21
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5樓2012-08-24 15:54:21
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6樓2012-08-24 15:55:47
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7樓2012-08-26 11:27:48
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8樓2012-08-27 10:39:59
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【答案】應(yīng)助回帖
| 首先，配制膠的時(shí)候要把瓊脂糖充分溶解，到溶液里沒有瓊脂糖了，核酸染料應(yīng)該沒有問題，腳的濃度再配大一點(diǎn)，拔梳子的時(shí)候注意點(diǎn)，不要把膠孔弄破了，直上直下的拔起來(lái)就應(yīng)該沒有問題，點(diǎn)樣的時(shí)候不要上樣太多，最好不要漫出點(diǎn)樣孔，最后電泳時(shí)電壓低一點(diǎn)，時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)，前面的顯色液最多過了2/3膠板長(zhǎng)度就可以了，感覺你跑膠時(shí)間也有點(diǎn)久，都有點(diǎn)模糊了。這樣改進(jìn)下應(yīng)該就沒有什么問題了，祝好運(yùn) |
9樓2012-08-27 19:51:53
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10樓2012-08-29 12:11:00
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