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不要回頭

銅蟲 (初入文壇)

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[求助] 石蠟切片染色問題

在做根橫切面的石蠟切片，但是染色一直染不好，首先脫蠟時(shí)兩個(gè)二甲苯，一個(gè)20Min，一個(gè)10min,二甲苯+酒精15Min，這個(gè)時(shí)間應(yīng)該是充分的吧，另外，染色劑是番紅-固綠（番紅是水溶液，固綠是酒精溶液），剛開始以為番紅時(shí)間太短了，就從1.5H開始，后來一直染不好就加到了過夜，還是染不好，染番紅后進(jìn)行酒精脫水時(shí)顏色逐步褪去直到?jīng)]有了，脫水時(shí)間是每級(jí)30min，事實(shí)上后來時(shí)間還縮短到15分鐘的脫水時(shí)間。依然染不好，不知道問題現(xiàn)在到底在那一塊呢。
而且最近發(fā)現(xiàn)在顯微鏡下看，切出的片子細(xì)胞大多破碎的，我95%酒精脫水1個(gè)小時(shí)，2個(gè)100%酒精脫水共才1個(gè)小時(shí)，二甲苯和酒精混合液45Min，兩個(gè)二甲苯共1小時(shí)，感覺脫水和透明時(shí)間并不長(zhǎng)，現(xiàn)在就不知道問題出哪里了，明明肉眼看片子還是完整的，顯微下居然都是破碎的。

[ Last edited by 不要回頭 on 2012-9-3 at 13:32 ]

回復(fù)此樓

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1樓 2012-08-25 12:53:13

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chenhuize

木蟲 (正式寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

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不要回頭: 金幣+1, ★有幫助 2012-09-15 19:49:11

番紅固綠染色需要那么長(zhǎng)的時(shí)間？切片破碎可能是由于包埋浸蠟不到位。我見有實(shí)驗(yàn)室用的是專門做石蠟切片的萊卡的那一套，從包埋到染色到切片，很方便的。

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