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[交流]
caco-2細胞模型的驗證 已有1人參與
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| 各位蟲友,小弟最近在做caco-2細胞模型,打算用甘露醇評價膜的完整性,可是沒有查到評價方法。比如:甘露醇的濃度、透過率小于多少算合格。。請各位幫幫忙,給俺說說。。謝謝 |
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我們實驗室沒有用甘露醇或熒光黃,在實驗室剛建立Caco-2轉(zhuǎn)運模型時不僅要測電阻,還要對本實驗室的模型進行驗證,可以測定已知低、中、高滲透性的標準化合物的滲透性,和已報道的數(shù)據(jù)比對分析,進行驗證,只要數(shù)據(jù)相近,在同一數(shù)量級相差不非常大即可。模型驗證后,不能變動培養(yǎng)的條件,保持細胞10代以內(nèi)進行試驗,如總是使用37代到46代之間的細胞。 接種后培養(yǎng)19-21天后做實驗,只需測定電阻即可。有3天的時間可以選擇做,3天的時間是指培養(yǎng)的第19-21天之內(nèi)進行試驗。我們實驗室沒有用甘露醇或熒光黃,只是測定電阻值就可以了,國內(nèi)外絕大部分實驗室也是這樣做的,方法簡單,不干擾結(jié)果; 轉(zhuǎn)運實驗難在培養(yǎng),其它過程只要按SOP,小心操作就行了。 |
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