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emma立夏鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
請問pEGFP-N1這個(gè)載體轉(zhuǎn)化DH5能不能看到GFP的表達(dá)？
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請問，pEGFP這個(gè)質(zhì)粒能不能在原核菌里表達(dá)出GFP蛋白呢？ 還是一定要轉(zhuǎn)化真核才能見到gfp發(fā)綠光嗎？ 在真核轉(zhuǎn)化的時(shí)候，有沒有人用過酵母轉(zhuǎn)化試劑盒呢？ 謝謝大家！請有相關(guān)經(jīng)驗(yàn)的伙伴們能提供寶貴的建議�。。�！ |
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emma立夏
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送鮮花一朵 5樓2012-09-05 17:06:35
huguangdong
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
emma立夏: 金幣+8, ★★★很有幫助, 謝謝你的幫助 2012-09-05 17:03:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
emma立夏: 金幣+8, ★★★很有幫助, 謝謝你的幫助 2012-09-05 17:03:55
| pEGFP轉(zhuǎn)化原核菌無法看到綠色熒光，因?yàn)樵撦d體為真核表達(dá)載體，EGFP基因前啟動(dòng)子為真核啟動(dòng)子，無法在原核系統(tǒng)中起作用，因而EGFP是不會表達(dá)的，酵母中應(yīng)該可以，相關(guān)試劑盒咨詢試劑生產(chǎn)商，個(gè)人認(rèn)為該載體最好轉(zhuǎn)染293等模式細(xì)胞系來觀察熒光，效果最好，但是不知道樓主的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖鞘裁础? |
2樓2012-09-05 15:25:58
lidonghong
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3樓2012-09-05 15:59:04
emma立夏
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4樓2012-09-05 17:06:06
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