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小小技術(shù)官木蟲 (正式寫手)
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[求助]
菜鳥請(qǐng)教各位蟲大俠一點(diǎn)蛋白表達(dá)的知識(shí)，感激��！
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無論用原核系統(tǒng)還是真核系統(tǒng)，在表達(dá)蛋白時(shí)都有兩種選擇，即胞內(nèi)以包涵體的形式，或者分泌到胞外之后提取。但是對(duì)于目的蛋白，是根據(jù)什么來判斷選擇讓目的蛋白分泌到胞外或者胞內(nèi)表達(dá)的呢？ 比如，我最近是想表達(dá)蛋白，然后利用蛋白作為抗原免疫動(dòng)物，然后目的蛋白屬于免疫球蛋白超家族，有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，以什么樣的形式表達(dá)該蛋白更理想？為什么？ 麻煩大家?guī)臀页龀鲋饕�，謝謝各位！ |
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我不是稻草人
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2樓2012-09-06 16:41:10
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【答案】應(yīng)助回帖
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小小技術(shù)官: 金幣+1, ★有幫助, 系統(tǒng)全面，但是缺少細(xì)節(jié)性內(nèi)容。 2012-09-07 01:15:44
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-09-07 13:36:32
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2l有點(diǎn)不準(zhǔn)確，其實(shí)現(xiàn)在大多重組蛋白都是大腸桿菌表達(dá)，還有一部分酵母表達(dá)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞大量制備重組蛋白成本還太高。 樓主如果是為了制備抗體的話，用原核表達(dá)抗原就可以，盡量分泌表達(dá)。包涵體復(fù)性太麻煩。重組蛋白如果合成的太快容易形成包涵體，所以表達(dá)時(shí)需要在溫度，誘導(dǎo)試劑濃度等方面優(yōu)化。 |
3樓2012-09-06 17:26:07
小小技術(shù)官
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4樓2012-09-07 01:13:12
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