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mahoumeimei金蟲 (小有名氣)
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[求助]
fosmide克隆文庫
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| 各位,本人菜鳥,前段時(shí)間在文獻(xiàn)上看到作者構(gòu)建了fosmide克隆文庫,看了半天也沒太看懂。請(qǐng)問各位一般在什么情況下才需要構(gòu)建fosmide文庫啊?它除了插入片段長(zhǎng)之外,還有什么其它特點(diǎn)嗎? |
【分子生物】EPI帖 |
金蟲 (正式寫手)

金蟲 (小有名氣)
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金蟲 (正式寫手)

金蟲 (小有名氣)
金蟲 (正式寫手)
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一方面,提取的樣本基因組總DNA是十分復(fù)雜的,其中的很多成分也會(huì)對(duì)PCR起到抑制作用,如果不構(gòu)建fosmid文庫,直接進(jìn)行PCR,克隆成功的概率很低,畢竟要受到目的基因在基因組中的豐度高低的影響;另一方面,構(gòu)建fosmid文庫后,會(huì)將基因組DNA中大量的基因插入到fosmid質(zhì)粒中,可在大腸桿菌中保存,后續(xù)只需培養(yǎng)大腸桿菌即可進(jìn)行基因組信息的復(fù)制(即提取質(zhì)粒即可)。希望你能明白。很多文獻(xiàn)中會(huì)有更詳細(xì)的介紹。 |


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