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ROS數(shù)據(jù)
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| 我用DCFH-DA法測(cè)植物的ROS，最后在522nm下的吸光度值是20多（稀釋10倍的，我的蛋白含量*酶液=0.1），處理組是沒染毒的，師哥師姐測(cè)魚的也是20-50不等，測(cè)蚯蚓的相對(duì)高點(diǎn)，20-150不等，怎么判斷這些數(shù)據(jù)對(duì)不對(duì)呢？還是測(cè)出來數(shù)據(jù)就可以用來分析？有對(duì)DCFH-DA法比較了解的嗎？或者誰看過關(guān)于植物ROS的文章他們測(cè)的都是多少？粘幾篇給我看看吧，我英語(yǔ)不好查文獻(xiàn)都費(fèi)勁。。。。 |
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starseacow
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【答案】應(yīng)助回帖
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a71840584: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-09-14 11:02:22
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| 只要操作沒有問題，就按照你自己做出來的數(shù)據(jù)分析。我印象中沒見過像你這樣用熒光分光光度計(jì)測(cè)DCHFDA的，得你自己查查了。另外，別人文獻(xiàn)報(bào)道也不好參考，實(shí)驗(yàn)材料，儀器，體系不同，都會(huì)造成結(jié)果很大不同，尤其是測(cè)ROS |
2樓2012-09-12 15:50:00
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好的謝謝你啊，對(duì)于用用熒光分光光度計(jì)測(cè)ROS我是有的，有文獻(xiàn)，也有個(gè)網(wǎng)站討論過這個(gè)，我發(fā)你網(wǎng)址你抽空看一眼（里面有提到用熒光分光光度計(jì)測(cè)完讀數(shù)的） http://www.dxy.cn/bbs/topic/3106645 這個(gè)網(wǎng)站里有人提到的那個(gè)步驟和我們基本一樣，先磨樣取線粒體，再測(cè)蛋白確定加的酶液量和PBS量（探針量固定加10μL，總樣品體積3mL），37℃水浴完去熒光分光光度計(jì)測(cè),我們電腦上這個(gè)程序是設(shè)定好的，包括波長(zhǎng)什么的，然后讀數(shù)。基本思路就這樣。 |
3樓2012-09-13 15:33:16
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我們用的試劑盒是這個(gè) http://www.beyotime.com/reactive-oxygen/ros-assaykit.htm 再看看這個(gè) http://www.biorun.net/article_view.asp?id=71 還有這個(gè)網(wǎng)址的4樓也提到熒光分光光度計(jì)測(cè) http://bbs.antpedia.com/thread-149993-1-1.html 這個(gè)方法應(yīng)該沒問題吧，實(shí)驗(yàn)室用好久了，要是不行的話告訴我我去告訴老板說：你們這個(gè)方法是錯(cuò)的  在老板面前顯擺下 |
4樓2012-09-13 15:53:27
starseacow
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5樓2012-09-13 20:29:18
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