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wushuwei1104銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
緊急求助5‘RACE（測(cè)序結(jié)果問(wèn)題）
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鄙人最近在做5’RACE，用的是Clontech的SMARTer RACE cDNA Amlification Kit試劑盒。巢式PCR玩切膠回收，純化測(cè)序，測(cè)序結(jié)果是這樣子的：出來(lái)一個(gè)100多得片段，經(jīng)過(guò)同源比對(duì)，發(fā)現(xiàn)這個(gè)片段比其他物種的基因片段5‘端少20左右bp，但是在測(cè)出的片段中巢式前、后特異性引物都是有的。 就想請(qǐng)教一下：1，巢式PCR前、后特異性引物都能找到，但是片段比同源植物的基因片段5’端小20bp，有可能是在做5‘RACE前，提取的RNA在5’末端稍有降解，導(dǎo)致反轉(zhuǎn)錄出的片段不是完整的片段？ 2、有沒(méi)有可能這個(gè)植物中的這個(gè)基因片段就是比其他同源植物中的該基因片段��？ 謝謝各位大俠�。。� 小弟在此謝過(guò)�。�！ 急------- |
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gwd0312
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wushuwei1104
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