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樣品蛋白組分SDS-PAGE鑒定有多條帶，是否適合陰離子柱純化之
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2樓2012-09-26 09:48:16
3樓2012-09-26 10:33:05
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21樓2012-09-26 23:34:56
★ ★
meihuayi: 金幣+2, 謝謝你的關注，不知道你說的方法效果如何。我們實驗室沒這么做過，呵呵， 2012-09-27 19:35:11
meihuayi: 金幣+2, 謝謝你的關注，不知道你說的方法效果如何。我們實驗室沒這么做過，呵呵， 2012-09-27 19:35:11
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你Step洗的濃度太大了，介意你將200mM咪唑Elu下來的Desalting成無咪唑的buffer重新過一次His柱，然后介意拉線性洗脫目的蛋白，如果條件有限不能拉線性的話，就把梯度變小，5mM，10mM，20mM,50mM,100mM.200，300，500，這樣洗脫，ELU下來的目的蛋白就會比較純。 這樣之后再選取合適的合并過離子交換柱。因為看你的膠圖片，有幾條雜帶離目的帶很近，離子交換很難除，His的話或許可以。 你的PI值是6.1，那么陰離子的Buffer用7.5的就可以了，PH太高對蛋白也不好。過離子交換的話，也最好拉線性。 |
23樓2012-09-27 08:54:22
★
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
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本帖內容被屏蔽 |
24樓2012-09-27 12:58:58
簡單回復
chenghu5樓
2012-09-26 11:02
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
luckily102210樓
2012-09-26 12:57
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
majzh198712樓
2012-09-26 13:07
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
liang888713樓
2012-09-26 13:09
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
10臨藥田中華17樓
2012-09-26 17:42
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
wizardfan22樓
2012-09-27 06:08
回復
meihuayi(金幣+1): 謝謝參與
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