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say-jeremy新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求指點 青春雙歧桿菌分子鑒定
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設計青春雙歧桿菌引物、并使用通用引物，但是PCR產(chǎn)物跑膠后沒有一條條帶， 求高手指教，有做過青春雙岐桿菌菌種鑒定的么？ |
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2樓2012-10-09 14:47:00
Marado
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+4, 鼓勵應助 2012-10-09 15:49:16
感謝參與，應助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+4, 鼓勵應助 2012-10-09 15:49:16
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菌株鑒定，無非真核原核區(qū)別，原核16s，真核18s 我們實驗室做的很多，拿16s來說，PCR不出條帶的可能性很小吶，因為就算是水，只要不是非常干凈，都能P出來條帶，可能的原因有： 1：檢查一下你們用的酶，通用引物（這個重點檢查，污染可能性高）看看是不是被污染了，最好全部換掉再做 2：PCR條件？PCR的條件大致都一樣，退火溫度52~55℃都可以 3：沒條帶，是膠一片漆黑，還是只有Mark，如果連Mark都沒有的話，那就是跑膠問題了，重新配膠吧，不過這個可能性不大 PS：祝樓主好運，菌株鑒定是分子入門實驗，但是這一套做下來，也算入門了. |
3樓2012-10-09 15:09:07
4樓2014-12-21 20:37:38
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