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dujun2002金蟲 (小有名氣)
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[求助]
HA標(biāo)記的基因片段瞬轉(zhuǎn)293FT細(xì)胞,48h后收蛋白居然檢測不到,求助!
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老板覺得抗體不好用,想將蛋白標(biāo)上tag,好檢測。 于是我將原先的基因片段切下,PCR加上HA-tag,導(dǎo)入質(zhì)粒,酶切鑒定,然后再將含HA標(biāo)記的基因片段的質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)入293FT細(xì)胞,48h后提蛋白,用HA抗體孵育,居然沒有條帶。 費(fèi)了好些天時間做這個,覺得科研真是艱難。 各位高人,最可能哪一步出了問題?多謝! |
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