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張玉2008金蟲 (小有名氣)
胖胖魚
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[求助]
為什么我的maker總是不清晰
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如題，請高手們指導(dǎo)， 我用的TAKARA公司的DL500 DNA Maker，3%瓊脂糖凝膠，Tiandz 耐熱型SYBR染料3ul，100V，40min，跑出來的MAKER很不清晰，為什么呢？ maker不清晰.jpg 2.jpg |
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西瓜
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張玉2008: 金幣+3, ★★★很有幫助, 謝謝 2013-01-21 16:06:46
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重復(fù)煮對瓊脂糖本身沒什么大影響，但是會影響染料。EB的話，可以重復(fù)煮一次膠而不必補加EB。Sybr Green的熱穩(wěn)定性沒有EB好，如果重復(fù)煮膠，需要等膠涼下來再補加。當(dāng)然如果你是把染料加到樣品里，或者跑完膠之后再浸泡到染料里染色，則不存在這個問題。 條帶有波浪型，加上你說凝膠速度很快，那就是膠沒有均勻凝固了。我們一般是普通微波爐，中高火，兩分鐘，然后自然冷卻15分鐘左右就可以加染料了，0.5%~2%的膠都是這樣，沒問題。你說的半分鐘凝固是夸張了些。。。。。 另外，看條帶有點糊，可能是焦距沒調(diào)好，如果儀器上或者控制軟件上有“聚焦”、“散焦”的按鈕，那就自己調(diào)調(diào)看，以條帶最清晰、最銳利為宜。 |
24樓2012-10-21 11:34:52
zengjia351
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2樓2012-10-17 22:50:14
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7樓2012-10-18 14:53:52
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9樓2012-10-18 21:38:57
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10樓2012-10-19 00:24:28
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