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cherish_0301鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
有哪位大俠做過transwell測藥物通透性實驗？求助啊
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有誰做過24孔板的transwell測caco-2細(xì)胞TEER值的。我第一次做，很多細(xì)節(jié)不是很清楚，比如接種細(xì)胞密度，加樣量，加藥時間等等。我要測定胰島素藥物的通透性，希望大家把步驟貼上來共享，或者有類似的碩士論文的，還有測得的TEER值的規(guī)律。不勝感激。。。 [ Last edited by silicare on 2014-2-18 at 08:15 ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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cherish_0301: 金幣+1, ★有幫助 2013-03-07 10:46:24
cherish_0301: 金幣+1, ★有幫助 2013-03-07 10:46:24
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我的畢業(yè)課題就是這個。 測定單層細(xì)胞的跨膜電阻值（TEER） 跨膜電阻值（TEER）提供跨細(xì)胞單層的離子流電阻信息，與細(xì)胞間緊密連接的完整性相關(guān)。測定方法：首先將電極放入預(yù)熱至37°C的HBSS中，平衡20分鐘；移走培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，加入預(yù)熱的HBSS，在AP側(cè)每孔加0.5 ml，BL側(cè)每孔加1.5 ml , 37°C平衡20分鐘，同時洗去細(xì)胞表面的雜質(zhì)；移走HBSS，重新加入預(yù)熱的HBSS，測定跨膜電阻值值；用1個空白載體重復(fù)上述步驟以獲得空白值；TEER=（測定電阻值—空白值） 單層表面積（cm2）。 希望對你有幫助。 |
3樓2012-12-08 16:43:57
cherish_0301
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 121.9
- 紅花: 1
- 帖子: 14
- 在線: 9.6小時
- 蟲號: 1690035
- 注冊: 2012-03-14
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
2樓2012-10-22 15:55:34
【答案】應(yīng)助回帖
| Caco-2細(xì)胞單層在12天后TEER值達(dá)到最大值， 21天后細(xì)胞分化完成，形成緊密單層，TEER為（450±15）Ω•cm2>350Ω•cm2；MDCK-Wild細(xì)胞單層在4天后TEER值達(dá)到最大值， TEER值為（240±12）Ω•cm2>150Ω•cm2；MDCK-MDR1細(xì)胞單層在4天后TEER值達(dá)到最大值，7天后細(xì)胞分化完成，形成緊密單層，TEER值為（230±13）Ω•cm2>150Ω•cm2。數(shù)據(jù)表明三個細(xì)胞單層的致密性與完整性均良好[7,8]。 |
4樓2012-12-08 16:44:31
5樓2013-04-23 18:34:04
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