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[求助] 純化蛋白質(zhì)時(shí)，用Miracloth過(guò)濾

求純化蛋白質(zhì)時(shí)，用Miracloth過(guò)濾的具體步驟。Miracloth的孔徑是多少？過(guò)濾的時(shí)候可以用其他什么的濾膜代替嗎？

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1樓 2012-10-24 14:19:07

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cicelyzh

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-10-26 13:36:30

Miracloth只能除去非常大的不溶物，一般用于破碎后除去組織不溶物，孔徑大小是22-25um，一般的細(xì)胞、細(xì)菌都可以過(guò)，不知道對(duì)你純化蛋白有什么用。如果你想上柱，必須用微孔濾膜。

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2樓2012-10-25 06:58:46

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2樓: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-25 06:58:46
Miracloth只能除去非常大的不溶物，一般用于破碎后除去組織不溶物，孔徑大小是22-25um，一般的細(xì)胞、細(xì)菌都可以過(guò)，不知道對(duì)你純化蛋白有什么用。如果你想上柱，必須用微孔濾膜。

我看的一篇外文的，是用Miracloth。請(qǐng)問(wèn)一下我如果用微孔濾膜，得用多大孔徑的呀？我純化的蛋白質(zhì)大概在20kD左右

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3樓2012-10-26 09:31:44

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【答案】應(yīng)助回帖

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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-10-27 15:49:51

可以用0.22或者0.45um的微孔濾膜。一般蛋白質(zhì)分子很小的，即使大的蛋白復(fù)合體的直徑也是在nm級(jí)別的。一般純化蛋白樣品想上普通分離柱的話最好過(guò)濾，如果要上HPLC必須過(guò)濾。

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4樓2012-10-27 06:58:07

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引用回帖:

4樓: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-27 06:58:07
可以用0.22或者0.45um的微孔濾膜。一般蛋白質(zhì)分子很小的，即使大的蛋白復(fù)合體的直徑也是在nm級(jí)別的。一般純化蛋白樣品想上普通分離柱的話最好過(guò)濾，如果要上HPLC必須過(guò)濾。

那0.22或0.45的微孔濾膜有什么區(qū)別？應(yīng)該選用哪種呢?

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5樓2012-10-28 19:16:16

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【答案】應(yīng)助回帖

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日月當(dāng)空: 金幣+2, ★有幫助 2012-10-29 08:09:39
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-10-29 15:46:33

引用回帖:

5樓: Originally posted by 日月當(dāng)空 at 2012-10-28 19:16:16
那0.22或0.45的微孔濾膜有什么區(qū)別？應(yīng)該選用哪種呢?...

區(qū)別不是很大。0.22um的孔徑稍微小一些，過(guò)濾后的樣品更細(xì)，上柱子更好一些。但有些樣品比較粘稠，過(guò)0.22的膜不是很容易。

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6樓2012-10-29 00:34:00

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