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minmin-911銅蟲 (小有名氣)
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HPLC 用C18反相柱鑒定蛋白純度，蛋白峰與溶劑峰混在一起怎么辦？ 已有1人參與
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用HPLC C18反相柱鑒定純化蛋白質(zhì)純度，如圖所示，是不是我的目標(biāo)蛋白的極性太強(qiáng)，導(dǎo)致與溶劑峰混在一起，出峰太早？28min的峰為流動(dòng)相的峰。那該怎么解決這個(gè)問題呢？菜鳥求救啊！ 圖1為空白對(duì)照： Tris-HCL 含NaCl 0.12M (pH 7.2) 圖2為樣品溶于Tris-HCL 含NaCl 0.12M (pH 7.2) HPLC柱子：C18, 4.6 mm × 250 mm, 300 A 洗脫液： Solvent A，1%乙酸水溶液 Solvent B，100%甲醇 洗脫條件： 0-10min 10%-30% B 10-20min 30%-70% B 20-40min 70% B 流速為 1.0 ml/min 檢測(cè)波長(zhǎng)為：280 nm 目標(biāo)蛋白分子量為25KDa, pI為5左右。 圖1 對(duì)照.jpg 圖2 樣品.jpg |
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