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[交流]
BP clonase II enzyme mix 多克隆連接 已有5人參與
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| 誰用BP clonase II enzyme mix做過多克隆連接,我連接了兩個月了還是連不上不知道什么原因,蟲友們幫幫我,萬分感謝! |
鐵蟲 (初入文壇)
專家顧問 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗: +426 |

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你好,非常感謝你的回復(fù),我的B位點DNA片段大概是4kb,我用的5ulBP反應(yīng)體系,B位點DNA片段的濃度和用量為1ul,20-60ng/ul.不知道用量是否有點少,連接時間為16h,l連接產(chǎn)物取1ul熱擊法轉(zhuǎn)入50ulDH5α感受態(tài)中,最終平板上長出的菌落數(shù)只有幾個檢測也不是目的entry clone,不知道我上面的操作方法有沒有什么問題還請你指出,我現(xiàn)在想嘗試一下電擊轉(zhuǎn)化,因為我覺得問題可能在轉(zhuǎn)化上了。還請你給出意見和建議。 |
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