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yutaoweiwei新蟲 (初入文壇)
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[求助]
哪位大俠能幫忙設(shè)計(jì)熒光定量引物
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物種：玉米 內(nèi)參actin sense GTTGGGCGTCCTCGTCA antisense TGGGTCATCTTCTCCCTGTT 退火溫度60 小女子新手，之前設(shè)計(jì)過N對引物，終于有一個(gè)P出來了，測序結(jié)果也對，但是不知為什么，時(shí)而P出來,時(shí)而P不出來，到最后根本不出來了，郁悶！而且熒光定量的曲線也不好，峰值也不好，后來有人說引物需要跨內(nèi)含子設(shè)計(jì)，我的引物沒有跨內(nèi)含子，小女子實(shí)在是設(shè)計(jì)不了了，懇請哪位大俠幫忙看看，感激涕零�。�！ 基因信息見附件，為預(yù)測的，其中CDS區(qū)以驗(yàn)證，含有兩個(gè)外顯子，一個(gè)內(nèi)含子，中間黃色的三個(gè)堿基為第一個(gè)外顯子后三個(gè)堿基。 本人新蟲，還請各位大俠不要嫌金幣少，幫幫忙，在線等。。。。。。。 |
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2012-11-05 17:38:32, 21.94 K
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2樓2012-11-05 18:58:37
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4樓2012-11-06 09:03:49
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5樓2012-11-06 16:23:40
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6樓2012-11-07 08:09:09
yutaoweiwei
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7樓2012-11-08 20:51:22
【答案】應(yīng)助回帖
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http://tools.invitrogen.com/cont ... amp;icid=fr-oligo-6 這個(gè)網(wǎng)站上直接可以根據(jù)需要得到你需要的引物，而且能保證設(shè)計(jì)的引物退火溫度都大約在60度左右 |
8樓2012-11-09 09:09:27
liuan6126
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9樓2012-11-11 11:31:41
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