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集氣瓶鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
小球藻的誘變及培養(yǎng)條件,有做過的前輩嗎?
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現(xiàn)在我正在做小球藻的紫外誘變,看到一篇論文中寫道“取對數(shù)期藻液6ml置小培養(yǎng)皿內(nèi),在磁力攪拌下,用紫外燈(30 W,照射距離為30 cm)照射.照射時間分為3、6、9、1 5、20 min,每種劑量做3個重復.48h后,當死亡細胞數(shù)達到穩(wěn)定時,計算 相對致死率(將各處理組的死亡細胞數(shù)除以起始細胞數(shù)),并確定有效的誘變劑量!边@個地方具體怎么操作的?比如是將照射完的6ml培養(yǎng)皿直接放在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),然后48h后顯微鏡計數(shù)嗎? 還有就是關(guān)于突變株篩選的描述“取5ml輻照物接種到裝有20m1培養(yǎng)液的三角瓶中,遮光3 h 避免光修復,再光照培養(yǎng)一段時間,待細胞恢復增殖能力后,經(jīng)平板分離,挑取體積較大的單藻落于小三角瓶中培養(yǎng),待長成后,分別接種到250ml三角瓶. 先在溫度為23士0.5℃ ,光強為1000~1200 Ix條件下靜養(yǎng)6天測其生長速率,再轉(zhuǎn)至溫度為25士1.5℃,光強為5000~6000 lx的搖床(往復式,90 r/rain)培養(yǎng)10天并測其蝦青素累積量. 根據(jù)此復篩結(jié)果,選定各項指標優(yōu)于出發(fā)株的變異藻株.”這個地方的靜養(yǎng)測生長速率,而不是放在搖床上,CO2的量能保證嗎?而且小球藻不會沉淀嗎? |

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