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yaxing2009銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
液相
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| 問(wèn)下大家 我在用液相測(cè)定樣品的時(shí)候 經(jīng)過(guò)條件摸索 最后確定了一個(gè)極性比較大的流動(dòng)相，但是用這個(gè)流動(dòng)相時(shí)我樣品中含的一些極性小的物質(zhì)不能出峰（樣品爬板的時(shí)候出了個(gè)雜點(diǎn)），我現(xiàn)在想看看樣品的的純度，用了一個(gè)極性小的流動(dòng)相，雜質(zhì)和產(chǎn)品都能出峰，就是產(chǎn)品的保留時(shí)間很小，請(qǐng)問(wèn)用這種方法看純度可行嗎？ |
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yaxing2009
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2012-11-29 16:30:47
lhg0209asd
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
jiangchunyong: 金幣+3, 謝謝 2012-11-29 18:29:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
jiangchunyong: 金幣+3, 謝謝 2012-11-29 18:29:02
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以我的經(jīng)驗(yàn)是不能的。如果想通過(guò)LC來(lái)確定： 1. 需要走一個(gè)全梯度的方法5%MeOH-100%MeOH 的梯度，如果HPLC需要60min分鐘比較合理，UPLC 8min比較合理 2. 最好有DAD檢測(cè)器，如果加一個(gè)MS那就更好了 3. 選擇適當(dāng)波長(zhǎng)，如有雙鍵的化合物都會(huì)在220nm下有吸收，無(wú)雙鍵結(jié)構(gòu)如三萜和長(zhǎng)鏈、脂肪酸等基本無(wú)紫外吸收，只能用210nm，如果你使用254nm檢測(cè)黃酮等類(lèi)的物質(zhì)，沒(méi)有雙鍵的三萜類(lèi)和脂肪酸類(lèi)的雜質(zhì)根本檢測(cè)不出來(lái)。 所以說(shuō)使用HPLC檢測(cè)純度需要很豐富的經(jīng)驗(yàn)。如果你有標(biāo)準(zhǔn)品只要操作誤差控制在合理范圍內(nèi)那就簡(jiǎn)單多了 |
2樓2012-11-29 16:16:18
lhg0209asd
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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4樓2012-11-29 16:50:05
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1 2012-11-30 19:05:06
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1 2012-11-30 19:05:06
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那你就用兩個(gè)流動(dòng)相做唄！ 一個(gè)看樣品前面的雜質(zhì)，一個(gè)看樣品后面的雜質(zhì)。然后把兩個(gè)加起來(lái)。你可以參考美國(guó)藥典加巴噴丁的樣子，人家就是用的前后洗脫的方法。沒(méi)有用梯度。乙腈-水的梯度很容易出鬼峰，如果檢測(cè)波長(zhǎng)低，噪音更大。而且做梯度起碼要用一個(gè)梯度跑5遍以上的空白才能穩(wěn)定下來(lái)做測(cè)定，所以不知道你有沒(méi)有穩(wěn)定夠。不信你看看壓力曲線就知道了。 |
5樓2012-11-30 13:30:58
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