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常用幾種分子篩凝膠介紹 已有5人參與
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由于做實(shí)驗(yàn)經(jīng)常碰到分離純化選用填料的問題，整理幾種分子篩凝膠及應(yīng)用 做純化的人可能經(jīng)常接觸到sephadex，BIO-Gel，sephacryl s-,sepharose BIo-Gel等幾種填料，有時(shí)會(huì)混淆在一起，看到一個(gè)貼子較好的介紹了這些填料的區(qū)別，希望對大家有用。 sephadex(葡聚糖凝膠）：是由葡聚糖苷和3-氯-1，2環(huán)氧丙烷以醚鍵相互鉸鏈而成，不同型號(hào)的葡聚糖凝膠用英文字母G表示，如G-25，G-75等，G后面的數(shù)字為凝膠吸水量再乘以10。 sephacryl：為葡聚糖偶聯(lián)丙烯基，再和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的介質(zhì)。它有較高的硬度，能承受比普通凝膠更大的靜水壓力，由于屬于部分大網(wǎng)孔型凝膠，可用于分離蛋白質(zhì)、核酸、多糖和蛋白聚糖甚至是病毒顆粒。 sepharose瓊脂糖：瑞典稱sepharose；美國稱Bio-gel A；英國稱Segavac；丹麥稱Gelarose。Sepharose主要有三種型號(hào)：2B，4B，6B，阿拉伯?dāng)?shù)字表示凝膠中干膠的百分含量。Bio-GA有6個(gè)型號(hào)：0.5M,1.5M,5M,15M,50M,150M。阿拉伯?dāng)?shù)字乘以1000000表示排阻限度。Sagavac分為：2F,4F,6F,8F,10F2℃4C6℃8C10℃阿拉伯?dāng)?shù)字表示凝膠中干膠的百分含量，F(xiàn)表示粉末狀，C表示顆粒狀。Gelarose有5種類型：2%，4%，6%，8%，10%。百分?jǐn)?shù)表示干膠量。 瓊脂糖凝膠屬于大孔膠，由于其工作范圍的下限幾乎相當(dāng)于葡聚糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠的上限，所以多用于分離400000以上的物質(zhì)，比如核酸和病毒。聚丙烯酰胺凝膠：由單體丙烯酰胺合成線性多聚物，商品名為Bio-Gel P，有十種類型：從Bio-Gel P-2到P-300，p后面的阿拉伯?dāng)?shù)字乘以1000即相當(dāng)于排阻限度。這種膠在極端ph下可被水解，水解后形成的羧基，具有離子交換的性質(zhì)。另外，sephadex G是葡聚糖凝膠交聯(lián)的，用于除鹽和純化，BIO-Gel P-是聚丙烯酰胺凝膠，它們的剛性都不是很好，尤其是得水值越大的，越是如此。而sephacryl s-,是經(jīng)過接枝再交聯(lián)的葡聚糖凝膠，剛性比sephadex G好很多，如果你純化的物質(zhì)分子量小些，那可以用sephadex G是，中等偏大的選擇sephacryl s-,特別大的就得選擇sepharose（瓊脂糖凝膠），例如幾十到上百KD的蛋白，或者是病毒，大分子的超螺旋DNA等，而BIo-Gel A也是瓊脂糖凝膠。它們只是不同的公司而已，性能差別不大。 水合微球尺寸 (µm) 水合床體積質(zhì)量干燥凝膠 典型流速 (cm/hr)* 分子量分級分離范圍 Bio-Gel P–2，優(yōu)良 45–90 3 ml/g 5–10 100–1,800 Bio-Gel P–2，特優(yōu) <45 <10 Bio-Gel P–4，中等 90–180 4 ml/g 15–20 800–4,000 Bio-Gel P–4，優(yōu)良 45–90 10–15 Bio-Gel P–4，特優(yōu) <45 <10 Bio-Gel P–6，中等 90–180 6.5 ml/g 15–20 1,000–6,000 Bio-Gel P–6，優(yōu)良 45–90 10–15 Bio-Gel P–6，特優(yōu) <45 <10 Bio-Gel P–6DG 凝膠 90–180 15–20 Bio-Gel P–10 凝膠，中等 90–180 7.5 ml/g 15–20 1,500–20,000 Bio-Gel P–10 凝膠，優(yōu)良 45–90 10–15 Bio-Gel P–30 凝膠，中等 90–180 9 ml/g 7–13 2,400–40,000 Bio-Gel P–30 凝膠，優(yōu)良 45–90 6–11 Bio-Gel P–60 凝膠，中等 90–180 11 ml/g 4–6 3,000–60,000 Bio-Gel P–60 凝膠，優(yōu)良 45–90 3–5 Bio-Gel P–100 凝膠，中等 90–180 12 ml/g 4–6 5,000–100,000 Bio-Gel P–100 凝膠，優(yōu)良 45–90 3–5 個(gè)人經(jīng)驗(yàn)有限，望后人繼續(xù)補(bǔ)充有價(jià)值的信息。 |
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