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zhangdapeng木蟲 (著名寫手)
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[求助]
Sf-9昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)
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| 請(qǐng)問(wèn)哪位蟲友養(yǎng)過(guò)Sf-9或Hi-5昆蟲細(xì)胞表達(dá)蛋白的嗎？你們用的是什么培養(yǎng)箱（廠家，型號(hào)）？你們是懸浮培養(yǎng)還是靜態(tài)培養(yǎng)？有什么需要注意的地方 |
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zhangdapeng: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝！我問(wèn)過(guò)別的研究所，但是我詢問(wèn)了價(jià)錢要一萬(wàn)多歐元，老師覺(jué)得太貴了， 2012-12-02 22:44:21
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培養(yǎng)箱可以調(diào)節(jié)溫度的，用grace培養(yǎng)基，我們用的是gibco的，培養(yǎng)箱的溫度要調(diào)節(jié)到20°，懸浮培養(yǎng)。 你可以查查文獻(xiàn)，或者百度什么的多看看，問(wèn)問(wèn)其他師哥師姐的。祝你成功哦！ |
2樓2012-12-02 17:14:22
wzysllm
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keennes
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wizardfan: 金幣+2, 謝謝分享經(jīng)驗(yàn) 2012-12-03 04:51:50
zhangdapeng: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝！ 2012-12-04 21:58:10
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| 我是恒定28度培養(yǎng)，細(xì)胞均貼壁生長(zhǎng)，不需要二氧化碳，gibco的grace培養(yǎng)基，10%新西蘭進(jìn)口血清，無(wú)需滅活，培養(yǎng)時(shí)將培養(yǎng)瓶蓋稍微擰緊些。生長(zhǎng)狀態(tài)很好，差不多兩三天傳代一次。 |
3樓2012-12-03 00:39:35
resurgam
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4樓2012-12-03 05:53:01
wzysllm
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhangdapeng: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝！能否提供型號(hào)？是否可以搖？我想懸浮培養(yǎng) 2012-12-06 12:39:48
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zhangdapeng: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝！能否提供型號(hào)？是否可以搖？我想懸浮培養(yǎng) 2012-12-06 12:39:48
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我們用的是三洋的二氧化碳生化培養(yǎng)箱，但sf9不需要通CO2，26度貼壁培養(yǎng)就可以。買這個(gè)培養(yǎng)箱的話以后養(yǎng)其他細(xì)胞可能也能用上，但價(jià)格可能不便宜。 由于無(wú)需同CO2，所以用的細(xì)胞培養(yǎng)瓶Thermo公司是那種密封瓶口的，不是一般帶透氣功能的培養(yǎng)瓶。 培養(yǎng)基用過(guò)Gibco的grace公司培養(yǎng)基和Aoolichem公司改良后的TC-100昆蟲培養(yǎng)基。雙抗和FBS就不用多說(shuō)了。 如果需要大批量養(yǎng)細(xì)胞的話，可以用那種轉(zhuǎn)瓶機(jī)來(lái)養(yǎng)，我們現(xiàn)在用的一次可以加入2-3L的細(xì)胞培養(yǎng)基，無(wú)論貼壁還是懸浮都長(zhǎng)的很好。 |
5樓2012-12-05 10:01:54
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8樓2012-12-07 17:40:12
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9樓2012-12-07 17:40:49
resurgam
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10樓2012-12-07 19:48:38
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