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num20062622

銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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8樓: Originally posted by starseacow at 2012-12-07 00:29:48
動(dòng)力學(xué)曲線法。。。真是夠?qū)I(yè)的名字啊。
測(cè)這幾個(gè)酶沒(méi)必要這么麻煩，直接取幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)即可，例如1min 和 3 min，一般在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)酶活變化是一條直線。如果樓主不確信可以自己做一條曲線以確定時(shí)間點(diǎn)。...

是師姐告訴我的..
她做CAT的時(shí)候只用一個(gè)石英比色皿放在紫外分光光度計(jì)的最外邊的那個(gè)杯槽里設(shè)置3min 然后測(cè)定.

但我總覺(jué)得有點(diǎn)問(wèn)題...
因?yàn)樗龥](méi)有調(diào)零也沒(méi)有對(duì)照...

所以我想問(wèn)測(cè)CAT 跟POD的時(shí)候是怎么進(jìn)行測(cè)定的...

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11樓2012-12-07 21:35:18

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4樓: Originally posted by 桐眠 at 2012-12-04 10:49:42
不需要對(duì)照，可以選擇前幾十秒比較好的曲線（所有樣品時(shí)間最好能夠統(tǒng)一），計(jì)算出斜率就行了

= =.
不需要對(duì)照怎么調(diào)零...

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12樓2012-12-07 21:36:00

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starseacow

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

11樓: Originally posted by num20062622 at 2012-12-07 21:35:18
是師姐告訴我的..
她做CAT的時(shí)候只用一個(gè)石英比色皿放在紫外分光光度計(jì)的最外邊的那個(gè)杯槽里設(shè)置3min 然后測(cè)定.

但我總覺(jué)得有點(diǎn)問(wèn)題...
因?yàn)樗龥](méi)有調(diào)零也沒(méi)有對(duì)照...

所以我想問(wèn)測(cè)CAT 跟POD的時(shí)候是怎 ...

同樣的檢測(cè)體系不加待測(cè)樣品調(diào)零即可，我一般準(zhǔn)備兩個(gè)皿，另一個(gè)里加樣品計(jì)時(shí)測(cè)定。你師姐那么做，相當(dāng)于用空氣或什么別的東西調(diào)零，但由于我們最后記錄的是吸光度隨時(shí)間變化值，所以只要數(shù)據(jù)變化處在儀器可信檢測(cè)范圍內(nèi)，雖說(shuō)操作不規(guī)范，但結(jié)果我覺(jué)得沒(méi)什么問(wèn)題。

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植物生理群69993869，為避免廣告，申請(qǐng)加入請(qǐng)?zhí)峁┠鞠x(chóng)昵稱，院校及專業(yè)信息

13樓2012-12-07 22:07:44

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13樓: Originally posted by starseacow at 2012-12-07 22:07:44
同樣的檢測(cè)體系不加待測(cè)樣品調(diào)零即可，我一般準(zhǔn)備兩個(gè)皿，另一個(gè)里加樣品計(jì)時(shí)測(cè)定。你師姐那么做，相當(dāng)于用空氣或什么別的東西調(diào)零，但由于我們最后記錄的是吸光度隨時(shí)間變化值，所以只要數(shù)據(jù)變化處在儀器可信檢測(cè) ...

對(duì)啊. 我看兩個(gè)師姐做的不一樣..所以我才想問(wèn)問(wèn)大家是怎么測(cè)的...
我其中一個(gè)師姐做的時(shí)候是用兩個(gè)比色皿一個(gè)加混合體系不加酶液一個(gè)加混合體系加酶液 ...
另外一個(gè)師姐做的時(shí)候是只用一個(gè)比色皿沒(méi)有調(diào)零
就是只用那以個(gè)比色皿加混合體系和加酶液的比色皿放在光度計(jì)測(cè)定的.
你說(shuō)她相當(dāng)于用空氣調(diào)零?- 0-.我還是用跟你們一樣兩個(gè)比色皿測(cè)的方法測(cè)好了...

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14樓2012-12-09 19:40:58

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poog502

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10樓: Originally posted by num20062622 at 2012-12-07 21:32:44
CAT測(cè)出來(lái)就是負(fù)值.
因?yàn)镃AT是測(cè)的是290nm的H2O2的吸光度
CAT催化雙氧水變成水和氧氣..
我想問(wèn)的是測(cè)CAT的時(shí)候是不是要兩個(gè)石英比色杯。
一個(gè)是用緩沖液調(diào)零對(duì)照一個(gè)是測(cè)定管. 然后設(shè)置190S進(jìn)行時(shí)間掃描測(cè)定....

CAT是記錄在240nm吸光值的變化情況，不需設(shè)置對(duì)照！

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15樓2012-12-11 15:20:01

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dovina_liu

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3樓: Originally posted by poog502 at 2012-12-04 10:06:05
不用設(shè)置對(duì)照，選擇曲線好的一段直接減法計(jì)算即可

請(qǐng)問(wèn)一下計(jì)算出的斜率值是代表什么？

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16樓2013-05-30 15:40:10

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boluodehai

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弱弱的問(wèn)一下你的POD CAT測(cè)的結(jié)果怎么樣

話說(shuō)小弟也在測(cè)，給點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)啊親

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17樓2013-06-04 15:01:07

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17樓: Originally posted by boluodehai at 2013-06-04 15:01:07
弱弱的問(wèn)一下你的POD CAT測(cè)的結(jié)果怎么樣

話說(shuō)小弟也在測(cè)，給點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)啊親

話說(shuō)我的樣采的不好好像酶活失活了所以沒(méi)測(cè)好./
他們說(shuō)CAT不是很好測(cè).
酶液不要反復(fù)凍融就可以。
只要你的樣采的沒(méi)問(wèn)題一般都能測(cè)出來(lái)
要有信心做.

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18樓2013-06-05 17:06:22

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