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[求助]
蛋白
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| 測(cè)的SOD、CAT、POD、MDA趨勢(shì)都很好，但是蛋白測(cè)的就很亂，結(jié)果最后導(dǎo)致趨勢(shì)全沒(méi)了，蛋白就是用考馬斯亮藍(lán)測(cè)的，標(biāo)曲一次就測(cè)了倆9出來(lái)，測(cè)蛋白的時(shí)候也沒(méi)出很么問(wèn)題，為什么這么亂呢，植物在受到損傷體內(nèi)蛋白是減少的還是增加的能確定嗎？我是用0.05mol,pH7.8的磷酸鹽緩沖液研磨樣品的，里面還含1%的PVP和1mM的EDTA，另外PVP這個(gè)東西會(huì)和考馬斯反應(yīng)嗎？ |
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2樓2012-12-05 23:05:34
3樓2012-12-05 23:43:35
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4樓2012-12-06 00:10:29
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哦我的是用去離子水調(diào)零，你用考馬斯調(diào)零你的標(biāo)曲豈不是要過(guò)原點(diǎn)，我這次的考馬斯確實(shí)沒(méi)配好。。。，剛配完去測(cè)標(biāo)曲的時(shí)候沒(méi)加蛋白的考馬斯吸光度有0.7+，放冰箱靜止兩天后再去測(cè)只有0.6，再靜置兩天再去測(cè)只有0.55。。，還有我的標(biāo)準(zhǔn)蛋白是1mg/ml的，測(cè)的時(shí)候加0.1ml各濃度標(biāo)蛋測(cè)標(biāo)曲，但是磨完樣測(cè)蛋白的時(shí)候我加0.1ml酶液考馬斯就變很藍(lán)所以我要稀釋?zhuān)蝗?0μL去測(cè)蛋白，但是20μL太少了就一滴不容易打出來(lái)所以覺(jué)著老有誤差，我是不是可以吧標(biāo)準(zhǔn)蛋白配的大一點(diǎn)，比如2mg/ml，這樣就不用稀釋去測(cè)蛋白了 |
5樓2012-12-09 20:16:29
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