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cDNA文庫構(gòu)建過程中甲基化dCTP有何用？
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| 朱玉賢《現(xiàn)在分子生物學(xué)》cDNA文庫構(gòu)建中（p157）說到，“在cDNA合成的過程中，應(yīng)選用活性較高的反轉(zhuǎn)錄酶及甲基化dCTP”，不知道甲基化dCTP有何用？ |
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gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-12-09 16:36:33
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-12-09 16:36:33
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哈哈，自己找到答案了！貼上來，或許有人會(huì)遇到和我一樣的問題 在cDNA的第一鏈合成過程中，加人甲基化的脫氧胞苷酸(5-methyl dCTP)以取代正常的脫氧胞苷酸(dCTP)，因此就可保護(hù)cDNA分子不被某些內(nèi)切酶(如Xho I)切割。因此，在進(jìn)行Xho I酶切時(shí)，只有接頭引物上的非甲基化的Xho I酶切位點(diǎn)可以被切割，而cDNA分子中的甲基化的Xho I酶切位點(diǎn)則不被切割，從而保證了cDNA分子的完整性。 |
2樓2012-12-09 00:50:30
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