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利用農(nóng)桿菌A4的Ri質(zhì)粒構(gòu)建富集重金屬基因的載體
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各位蟲友們，我現(xiàn)在正在利用Ri質(zhì)粒構(gòu)建富集重金屬IRT1和LCT1的基因載體，看目前文獻(xiàn)上用的比較多的是Ti質(zhì)粒，Ri質(zhì)粒的比較少，不知道各位有木有相關(guān)的文獻(xiàn)？或者哪位蟲友有做這方面的東西，請教一下~~~ 1.現(xiàn)在找不到Ri質(zhì)粒的酶切位點，查詢的質(zhì)粒圖譜都不太清楚（如圖），只能看到一個Kpn1的酶切位點，有了解這方面內(nèi)容的蟲友嗎~~~ 2.這兩個基因是導(dǎo)師之前定下的，我在NCBI上查到一些存在植物里的基因片段，每個植物都不一樣，我要怎么去選擇這些基因片段呢？（選擇好之后是否直接找公司合成就好了？） 3.構(gòu)建好的載體要導(dǎo)入到感受態(tài)細(xì)胞里，這個感受態(tài)細(xì)胞要從哪里購得呢？ 4.我的A4是從中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院里面）買的，一開始搖菌OD值0.6左右-20度凍菌，后拿出搖菌6小時左右就能達(dá)到OD值0.6，可以直接感染葉片誘導(dǎo)毛狀根，請問如果總是這樣凍菌，農(nóng)桿菌A4里面的250KB大質(zhì)粒會不會容易丟失。。。。 5.大家提大質(zhì)粒是不是有專門的提大質(zhì)粒試劑盒呀？ 啰啰嗦嗦這么多，科研的路上真的很艱辛啊，不懂的地方，只能麻煩各位蟲友了。。。真心真心感謝。。。  |
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2012-12-10 10:41:36, 20.87 K
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沒人回復(fù)么。。。。 2樓2012-12-11 10:26:03
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