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yjkang6587銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
LPS誘導(dǎo)BV2 細(xì)胞 NO檢測 不出結(jié)果 求指導(dǎo) 已有1人參與
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最近在做LPS誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活化，檢測NO，結(jié)果發(fā)現(xiàn)加LPS組的NO弄度和對照組基本一樣，求各位高手給指點迷津。 實驗步驟如下： 1.BV2細(xì)胞（購自于中科院昆明動物研究所細(xì)胞庫，編號KCB200770YJ），細(xì)胞種在24孔板中，細(xì)胞密度是10萬個/ml,每個孔里種500微升，培養(yǎng)24h。 2.細(xì)胞用PBS洗3次，加入含有LPS的無血清1640培養(yǎng)基，使LPS的終濃度為1微克每毫升，培養(yǎng)24h。 3.取細(xì)胞培養(yǎng)上清液50微升，加入等體積的Griess 1和Griess2 試劑，540nm檢測吸光度。（NO檢測試劑盒購自碧云天生物技術(shù)研究所） 脂多糖LPS購自Sigma O111：B4 產(chǎn)品編號L2630。LPS溶于PBS溶液中，配成100微克/ml， 分裝在EP管中，每管1ml于-20度保存。 這個實驗我重復(fù)了五次，NO檢測值一直沒有明顯變化，求各位高人給指點一下，不勝感激 |
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landa_sh
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