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[求助]
求如何理解錨定PCR原理，謝謝 已有1人參與
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看了幾遍，還是沒(méi)有搞懂，到底是啥意思，書(shū)里說(shuō)在該方案中兩條特異性引物是根據(jù)基因上部分序列設(shè)計(jì)的正反向序列特異性引物，分別用于擴(kuò)增其3`端5`端的未知序列。見(jiàn)圖，照?qǐng)D上所示，第一輪不就把已知序列的側(cè)翼序列擴(kuò)增出來(lái)了嗎，為啥還要進(jìn)行后續(xù)的幾輪pcr，現(xiàn)在需要了解這個(gè)原理，真誠(chéng)求教與達(dá)人，謝謝 圖片3.png 圖片2.jpg 圖片1.jpg [ Last edited by qwky2010 on 2012-12-12 at 14:43 ] |
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，請(qǐng)教達(dá)人，最好用通俗的語(yǔ)言來(lái)描述錨定PCR的原理吧，萬(wàn)分感激了 
2樓2012-12-12 14:47:10
引路者
銅蟲(chóng) (初入文壇)
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- 專(zhuān)業(yè): 空間生物學(xué)
3樓2015-10-31 11:19:13
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抱歉我按錯(cuò)了，沒(méi)說(shuō)完�。�！ 1.錨定PCR的方法和RACE相同，應(yīng)該就是同樣技術(shù)的不同名稱(chēng) 在反轉(zhuǎn)錄的時(shí)候加上兩個(gè)錨定的引物，這個(gè)引物能在反轉(zhuǎn)錄的時(shí)候使得第一鏈cDNA多出一段序列供PCR的引物結(jié)合用（多轉(zhuǎn)錄的序列在5‘或3’端，看進(jìn)行哪一種RACE） 2.實(shí)際操作過(guò)程中，第一次PCR常沒(méi)亮帶或條帶，所以進(jìn)行第二次PCR（巢式PCR）進(jìn)行特異性擴(kuò)增（順便富集） 以上，建議檢索“RACE”，這里有很多相關(guān)的資料~ |
4樓2015-10-31 11:23:19
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