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lqlmdyw鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
清高手幫忙,別人設(shè)計(jì)了一段引物,擴(kuò)不出想要的目的片段
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| 前幾天老板給了一對(duì)引物,擴(kuò)增每一段的序列,一直擴(kuò)不出了,老板讓我在NCBI上把該基因的全序列下載下來(lái),然后找出保守區(qū)域,把設(shè)計(jì)的引物和保守區(qū)域進(jìn)行對(duì)比。找出突變位點(diǎn),然后修改自己的引物。我出的這些,實(shí)際上我不會(huì)操作,請(qǐng)高手幫我詳細(xì)的說(shuō)說(shuō)具體的則呢操作。小弟新來(lái)的積分不多,希望好心人不嫌分?jǐn)?shù)多少,幫幫忙,再次小弟感激不盡,謝謝了! |
| 你可以先到NCBI prime Blas t查閱一下引物的特異性,看看這個(gè)引物能不能PCR出你所要的目的條帶。如果特異性好的話,就是PCR擴(kuò)增體系的問(wèn)題,比如你選用的酶好不好,這個(gè)是主要的因素。 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

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