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zangying1989新蟲 (初入文壇)
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[求助]
載體pTrcHis A和pETDuet-1差別。。謝謝。。
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| 載體pTrcHis A和pETDuet-1差別。。謝謝。。 |
新蟲 (初入文壇)
送鮮花一朵 |
您好,那我想再請(qǐng)教一下,同一基因,用pETDuet-1為載體在菌中表達(dá)出蛋白,破了細(xì)胞測(cè)出酶活,而用pTrcHis A為載體時(shí),測(cè)不到酶活,可能是載體原因嗎?謝謝啦 |
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
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不同點(diǎn) 1、啟動(dòng)子不一樣,pETDuet-1為t7啟動(dòng)子,需要在有DE3溶原菌中表達(dá),比如BL21(DE3),JM109(DE3),Rosetta(DE3),需要用IPTG誘導(dǎo);pTrcHis A為Trc啟動(dòng)子,trp-lac復(fù)合型啟動(dòng)子,不僅能在有DE3溶原菌中能表達(dá),在無DE3溶原菌中也可以利用組成型啟動(dòng)子trp表達(dá)。 2、pTrcHis A為單基因表達(dá)載體,pETDuet-1 Novagen公司Duet系列質(zhì)粒,為雙基因表達(dá)載體。 相同點(diǎn) 1、抗性一樣 2、ori一樣,所以這兩個(gè)質(zhì)粒不能共表達(dá)。 用過的只有這些了,還有pTrcHis A有myc抗原什么的,這些沒用上,就不總結(jié)了。 |

木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷

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