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[交流]
IEF時間過長
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1.我用的是17cm,pH3-10線性IPG膠條,等電聚焦程序如下: 17cm膠條: 水化 50V 12-16小時(17℃) 主動水化 S1 250V 線性 30分鐘 除鹽 S2 1000V 快速 1小時 除鹽 S3 10000V 線性 5小時 升壓 S4 10000V 快速 60,000伏小時 聚焦 S5 500V 快速 任意時間 保持 此程序是根據(jù)BIO-RAD公司的手冊來的,可是在據(jù)聚焦時發(fā)現(xiàn)電壓很小,離10000v很遠,有時候只有三四千伏特,這樣就導致聚焦時間很長。請問各位這是什么問題? 2.聚焦時在膠條兩極均有棕黃色物質(zhì)聚集,平衡時可以出去,感覺是溴酚藍聚集了,大家對此有何看法呢? |
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