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jozsh新蟲 (小有名氣)
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[求助]
組織和細胞中，膜蛋白，胞漿蛋白，核蛋白提取裂解液區(qū)別
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組織和細胞中，膜蛋白，胞漿蛋白，核蛋白提取裂解液區(qū)別 有人說提取膜蛋白要加2M還是7M的尿素，但是具體要加多少呢？？？？求配方�。。。。。。。。。�！核蛋白又怎么提取呢？？？？ |
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zx1984
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 出血、凝血與血栓
2樓2012-12-27 09:54:55
3樓2012-12-27 10:56:48
【答案】應助回帖
| 無意間發(fā)現(xiàn)這個，希望對樓主有用：取各組股四頭肌樣品2 g，置入20%勻漿液（250 mmol/L蔗糖，10 mmol/L碳酸氫鈉，5 mmol/L疊氮鈉），勻漿后離心（1200 g）10 min，留上清液，190000 g離心1 h，制備蔗糖梯度（25%、30%、35%），150000 g離心2 h，細胞膜成分從25%蔗糖的上半層收集，細胞內膜成分為30%和35%蔗糖層交界處收集，以10 mmol/L碳酸氫鈉，5 mmol/L疊氮鈉溶液稀釋各膜成分，190000 g離心1 h，以250 mmol/L蔗糖、50 mmol/L Tris （pH 7.4）溶液懸浮沉淀，所有過程在4℃進行。這樣的話，是不是細胞膜就可以提取其蛋白質了？ |
4樓2012-12-27 11:02:15
5樓2013-11-14 15:32:22
6樓2015-11-03 20:33:45
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