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[求助]
【lowry測(cè)酶活性，怎么確定光波長和做標(biāo)準(zhǔn)曲線】求問大神
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本人本科生，實(shí)驗(yàn)?zāi)芰页Ｒ话�，想求助各位，越詳�?xì)越好，剛注冊(cè)也木有多少金幣可以給……希望能得到好心人幫助，謝謝啦~ 我們做的是 測(cè)定某蟲子身體中不同情況下 5 種酶中，哪種酶占主導(dǎo)�？戳艘恍┪墨I(xiàn)，都是用分光光度計(jì)來測(cè)酶活性和含量。但是不知道怎么確定哪種酶用哪種波長來測(cè)定。還有標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白配比的濃度和測(cè)定牛血清的波長怎么確定呢？ 看了一些文獻(xiàn)，都沒有詳細(xì)的寫出這些實(shí)驗(yàn)步驟要求，比較糾結(jié)，有點(diǎn)頭大~~ |
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進(jìn)了這個(gè)論壇我就暈了，本來打算試試考研的，這么一看，考的信心都沒有了
求各路大神幫忙啊 
2樓2012-12-29 21:53:24
egaoxy
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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3樓2012-12-29 22:05:56
lzgxgz
至尊木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
RX_豆丁: 金幣+1, ★有幫助 2012-12-31 10:00:54
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
RX_豆丁: 金幣+1, ★有幫助 2012-12-31 10:00:54
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lowry法測(cè)不了活性，只能測(cè)蛋白濃度。 它是蛋白濃度測(cè)定的通用方法，所以區(qū)分不出你的樣品中哪種蛋白占主導(dǎo)，測(cè)定的是你樣品中所有蛋白的含量。 你想知道你樣品中幾種蛋白的比例，那么你可以分別純化出來，然后分別測(cè)定其含量，當(dāng)然純化過程或有損失；要不你知道其中的各種主要酶的比活也可以，通過測(cè)定樣品中其活性，計(jì)算出各自的蛋白濃度。 至于檢測(cè)波長，現(xiàn)在改良法為650nm，而這個(gè)是蛋白復(fù)合物的吸收峰波長，不論你是蛋白a，還是蛋白b，還是牛血清白蛋白；有對(duì)照品做標(biāo)準(zhǔn)曲線，這個(gè)波長差點(diǎn)也無所謂。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍和測(cè)定方法，在網(wǎng)上搜搜。 |
4樓2012-12-30 12:49:00
5樓2012-12-31 09:59:28
6樓2012-12-31 10:01:16
7樓2012-12-31 10:07:06
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