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desheng101木蟲(chóng) (正式寫手)
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[交流]
好不容易得到的單克隆莫名其妙的沒(méi)了 已有3人參與
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| 花了幾個(gè)月的時(shí)間做酶切連接，終于有一線希望。有單克隆挑取酶切鑒定測(cè)序基本能確定就是了。昨天把單克隆的菌質(zhì)粒重新提取一下準(zhǔn)備下一步，雙酶切怎么也切不出來(lái)2條帶，我真是無(wú)語(yǔ)了，以前能切出來(lái)，現(xiàn)在就一條帶，貌似是載體的條帶。實(shí)在不知道什么原因 |
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ccharlien
木蟲(chóng) (正式寫手)
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4樓2013-01-03 03:33:15
★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 切不出來(lái)很正常，另外你提供的信息太少了，不好判斷，給你說(shuō)下可能的原因和驗(yàn)證方式。有很多原因造成酶切不出來(lái)：1.假陽(yáng)性；2.確定有沒(méi)轉(zhuǎn)進(jìn)去，可以先嘗試做菌液PCR（挑單克隆后搖菌培養(yǎng)，用菌液直接做模板），做好對(duì)照。3.陽(yáng)性PCR的菌液，再提質(zhì)粒跑膠檢測(cè)大小是否正確。4.酶切吧，做陰陽(yáng)對(duì)照最好。如果前3步驟都正確，或者菌液PCR有陽(yáng)性，可以先去測(cè)序驗(yàn)證，至于最后酶切-------- |
2樓2013-01-01 01:59:43
cicelyzh
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3樓2013-01-01 03:22:14
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