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desheng101木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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求大神指導(dǎo)，現(xiàn)在睡覺(jué)都是這個(gè)破實(shí)驗(yàn)（帶圖） 已有3人參與
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第一張圖標(biāo)記的是所需要的，其他都不是，可以看出來(lái)單酶切條帶大約在6000，雙酶切大約2300，4000. 但是相同的菌液第二圖雙酶切只能看到一條帶，貌似是載體條帶。載體大小2300. 第二次Maker和第一次稍有不同。 第一次酶切和測(cè)序結(jié)果都基本說(shuō)明就是要的克隆。極度郁悶第一次和第二次的結(jié)果為啥不一樣，菌種都是一個(gè)管的。 第一次單雙酶切對(duì)比.jpg 第二次單雙酶切圖.jpg |
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ccharlien
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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4樓2013-01-03 03:31:05
snoopyzxx
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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2樓2013-01-01 18:25:37
cicelyzh
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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首先你的膠放反了吧。還有，用的什么marker最好說(shuō)明。 此外，你做酶切的不是質(zhì)粒嗎？怎么提到菌液的樣子。你的酶切體系用的質(zhì)粒太多，你的目的片段和載體都不是很小，沒(méi)必要上很多量，用0.3-0.5ug質(zhì)粒切就足夠了。質(zhì)粒量大有時(shí)候會(huì)造成酶切不完全，跑出來(lái)的帶也不好看。 關(guān)于你的質(zhì)粒是否正確的問(wèn)題。第二次做雙酶切的同時(shí)釋否也做了單酶切對(duì)照？6K和2K多的帶是很容易分辨的。 |
3樓2013-01-02 02:25:19
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