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fdong新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
southern背景太深，怎么辦
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我用DIG試劑盒（化學(xué)顯示法）做的， 我的泳道處有很深的背景，連普通marker(非DIG-marker)都能顯色出條帶。 請(qǐng)大家?guī)兔o點(diǎn)建議�。� 我的條件如下： 大腸基因組用量5ug,雙酶切過(guò)夜 探針使用濃度為：25ng/ml 雜交溫度50度（CG含量52%，長(zhǎng)度900bp) 雜交時(shí)間：過(guò)夜（約16-18小時(shí)） 膜洗滌條件：第一步：2×SSC 0.1%SDS 20度 5分鐘 兩次 第二步：68度 0.5×SSC 0.1%SDS 15分鐘 兩次 其他都按試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。 謝謝了，圖片如下：http://pan.baidu.com/share/link? ... ;uk=3774942464 看不到圖片可以點(diǎn)這個(gè)鏈接看http://l4.yunpan.cn/lk/QkG4jBcaFBjV5 另外，我轉(zhuǎn)膜用的是bio-rad mini Trans-blot進(jìn)行的濕法電轉(zhuǎn)膜，用TAE緩沖液，3h, 電壓很低20-30V但電流很高400mA，（因?yàn)閮x器限流，所以電壓調(diào)不上去）。大家是怎么做的？ [ Last edited by fdong on 2013-1-4 at 18:14 ] |
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