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vpz2007木蟲 (小有名氣)
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[求助]
ge HisTrap FF蛋白純化柱子使用問題
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| 請問各位蟲友用ge公司的 HisTrap FF 1ml蛋白純化柱子時，如果純化同一個蛋白，每次更換binding buffer，咪唑什么的濃度時該怎么清洗這個柱子？如果純化同一個蛋白，但是兩次純化之間只是相隔一兩天該怎么保存？這個預裝柱在清洗時需要去除鎳離子以及重新裝鎳嗎？ |
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cicelyzh
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【答案】應助回帖
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| elute后迅速用binding buffer洗，把咪唑濃度降下來。然后在用水洗。純化同一個蛋白的話，不需要很heavy洗，這樣就可以了，除非柱子非常臟了。只放一兩天的話，直接把柱子封好放在4度就可以了。裝好鎳的柱子一般不用除鎳重裝。如果反復用了很多次，鎳可能有流失，如果純化效果變差了，才需要把鎳完全除去后重裝鎳。 |
2樓2013-01-07 03:28:53
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