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1樓 2013-01-08 21:08:45

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liweixiaoye

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wuxiao549: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 謝謝了，寫(xiě)了這么多 2013-01-11 13:31:12
hsd3521: 回帖置頂 2013-01-12 19:31:17
hsd3521: 食品EPI+1 2013-01-12 19:31:25

另外，給你一個(gè)適合你的方法：
參照Wack等人的方法，分別取多糖EPS-1和EPS-2各5 mg，加入2 ml的2 mol/L三氟乙酸(TFA)在120 ºC水解2 h，或加入2 ml的0.2 mol/L TFA在80 ºC水解30 min；水解液減壓蒸干后，再加入少量甲醇減壓蒸干(重復(fù)3次)以除去殘留的TFA[9]。
然后，參照張惟杰報(bào)道的方法，制備多糖水解樣品的三甲基硅醚衍生物：即向上述的多糖水解樣品中加入1 ml吡啶、0.4 ml六甲基二硅氮烷和0.2 ml的三甲基氯硅烷，于80 ºC下反應(yīng)30 min；再加入1.5 ml蒸餾水并震蕩，待溶液分層后，1000 rpm離心10 min，取上層吡啶層進(jìn)行氣相色譜分析[3]。使用Agilent 6890N型氣相色譜儀、HP-5色譜柱(5% Phenyl Methyl Siloxane Capillary，30 m × 0.32 mm × 0.25 mm)和火焰離子檢測(cè)器(FID)，色譜條件如下：以氮?dú)鉃檩d氣，流速為1 ml/min；進(jìn)樣口和檢測(cè)器的溫度分別為250 ºC 和280 ºC；采用程序升溫：起始溫度100 ºC維持5 min，以5 ºC/min升至150 ºC，并于150 ºC維持5 min，最后以5 ºC/min升至240 ºC，并于240 ºC維持2 min；采用不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1 l。
同理，按上述方法制備標(biāo)準(zhǔn)單糖的三甲基硅醚衍生物并進(jìn)行氣相色譜分析，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)單糖衍生物和樣品保留時(shí)間保留時(shí)間的比較以確定EPS-1和EPS-2的單糖的組成，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)單糖衍生物和樣品各色譜峰的面積來(lái)計(jì)算單糖組成的摩爾比。

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vet_whj

人生短短幾個(gè)秋，不醉不罷休！

6樓2013-01-11 13:27:03

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liweixiaoye

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【答案】應(yīng)助回帖

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wuxiao549: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝 2013-01-11 13:30:40

其實(shí)做單糖組成不建議拿液相色譜來(lái)做，因?yàn)橐吹糜邪被O性柱）來(lái)做，ELSD或者RID為檢測(cè)器，流動(dòng)相用75%乙腈，用一款叫SUGAR-都的柱子，出了葡萄糖和半乳糖不能分開(kāi)，其他都可以分開(kāi)，缺點(diǎn)是響應(yīng)值太低，濃度在1mg/mL時(shí)才能達(dá)到較理想效果，而且由于是酸水解，雜質(zhì)也變較多，對(duì)于柱子具有致命的危害
另外一種就是用C18柱（非極性柱）來(lái)做，但必須衍生化以后才能做，用UV或者DAD作為檢測(cè)器，響應(yīng)值還可以，就是會(huì)有一些雜峰
因此，最理想的選擇還是GC

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人生短短幾個(gè)秋，不醉不罷休！

5樓2013-01-11 13:22:53

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remainlove

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wuxiao549: 金幣+5, ★有幫助, 我用液相做過(guò)，不行的，7個(gè)標(biāo)品就出來(lái)一個(gè)峰，你是怎么做的，分離效果很好嗎？ 2013-01-09 11:14:23

為什么分析多糖一定要用氣相做呀，用液相的方法不是也可以嗎？
而且好多多糖的分析都是用液相的，你如果是多糖分子量很大，用氣相分析反而不合適

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3樓2013-01-09 08:48:08

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zybpxy

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可以可以,我們實(shí)驗(yàn)室做多糖的GCMS都是用db-5

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走的太遠(yuǎn)，別忘了為何出發(fā)

8樓2013-05-12 17:39:12

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liweixiaoye

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【答案】應(yīng)助回帖

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wuxiao549: 金幣+10, ★有幫助, 我的標(biāo)準(zhǔn)品是含7個(gè)單糖，用非極性跑有兩個(gè)單糖表品是分不開(kāi)，請(qǐng)問(wèn)你做的時(shí)候，標(biāo)品用的幾個(gè)單糖，條件是什么啊 2013-01-09 11:12:46

這個(gè)柱子絕對(duì)可以，這個(gè)柱子是最適合分析單糖組成的柱子，用程序升溫的方法做，分析一個(gè)樣品不會(huì)超過(guò)40分鐘

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2樓2013-01-08 22:49:08

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zcm109

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【答案】應(yīng)助回帖

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wuxiao549: 金幣+5, ★★★很有幫助, 我是7種，有兩種分不開(kāi)，請(qǐng)問(wèn)你跑樣的條件是什么？ 2013-01-09 19:18:55

這個(gè)柱子完全可以我就用這柱子跑了5種單糖，且都能分開(kāi)

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Nothing is impossible!

4樓2013-01-09 13:54:27

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qindongnao

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引用回帖:

6樓: Originally posted by liweixiaoye at 2013-01-11 13:27:03
另外，給你一個(gè)適合你的方法：
參照Wack等人的方法，分別取多糖EPS-1和EPS-2各5 mg，加入2 ml的2 mol/L三氟乙酸(TFA)在120 ºC水解2 h，或加入2 ml的0.2 mol/L TFA在80 ºC水解30 min；水解液減壓蒸干 ...

請(qǐng)問(wèn)您一下，為什么“2 ml的2 mol/L三氟乙酸(TFA)在120 oC水解2 h，或加入2 ml的0.2 mol/L TFA在80 oC水解30 min”加入的TFA濃度低了反而水解溫度低了，水解時(shí)間短了呢，謝謝您
單糖標(biāo)品溶解的時(shí)候是不是用吡啶溶液溶解啊？
求您賜教

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7樓2013-05-12 17:03:34

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tjq-peter

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你好，我想問(wèn)問(wèn)這個(gè)方法定量是用內(nèi)標(biāo)法？還是外標(biāo)法？?jī)?nèi)標(biāo)物或外標(biāo)的物質(zhì)是分別是什么

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9樓2014-03-10 21:00:59

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vet_whj

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引用回帖:

請(qǐng)教一個(gè)問(wèn)題，分析多糖構(gòu)成時(shí) 如何選擇單糖標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)參照？我的一個(gè)多糖做液相色譜分析有一個(gè)峰不知道是哪種單糖產(chǎn)生的。如果方便就留個(gè)QQ號(hào)給我，我希望能有機(jī)會(huì)進(jìn)一步請(qǐng)教或合作做點(diǎn)兒事兒。

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10樓2014-06-13 10:56:39

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