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vivi憶默新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
哪位大神來(lái)告訴我，為什么最近提不出總DNA 已有10人參與
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| 我提的是窖池中微生物的總DNA，主要樣品來(lái)源為大曲，窖泥，前段時(shí)間用上海生工的Ezup柱式基因組DNA抽提試劑盒（細(xì)菌），也用過(guò)生工的土壤基因組抽提試劑盒，可是就是沒(méi)提出來(lái)，不知道什么原因，好著急，覺(jué)都睡不著了，都快一個(gè)月了，求各位大神指點(diǎn)。 |
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zhang881007
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3樓2013-01-11 08:56:51
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2樓2013-01-11 03:01:55
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4樓2013-01-11 10:21:30
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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| 最近也在做，就是土壤的微生物，我是通過(guò)把土壤上的微生物洗脫后，然后取上層清夜然后抽濾，得到菌體，再提DNA。一天中提了三次DNA，也是用試劑盒的，前兩次都沒(méi)提出來(lái)，后面加大菌量，同時(shí)菌的純度通過(guò)多次離心洗滌也得到提高，最后柱式洗脫時(shí)，TE預(yù)熱，室內(nèi)放置幾分鐘后，100微的TE分兩次洗滌的（即每次50微），最后提出來(lái)了，但是濃度有些偏低。所以個(gè)人拙見(jiàn)：認(rèn)為提細(xì)菌總DNA的關(guān)鍵是菌量和菌的純度（就是不要有其他雜質(zhì)污染，這個(gè)在后續(xù)的過(guò)程中可能會(huì)堵塞柱子，導(dǎo)致后面DNA得率低，嚴(yán)重的時(shí)候根本得不到）。come on !cheer up! |
5樓2013-01-11 11:44:18
6樓2013-01-11 13:37:38
vivi憶默
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7樓2013-01-11 13:44:26
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8樓2013-01-12 10:13:46
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9樓2013-01-12 13:15:11
vivi憶默
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10樓2013-01-15 15:01:31
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