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星星和太陽金蟲 (初入文壇)
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[求助]
小鼠胚胎干細(xì)胞的貼壁問題。
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| 各位蟲友們,是這樣,我在培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞,在代數(shù)比較低的時候,很容易形成EB,貼壁性能很差,隨著代數(shù)的增加,隨著分化,貼壁要稍微好一些,但是還是達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求,也用明膠處理培養(yǎng)板,現(xiàn)在就是想問一下,和大家交流,明膠處理之后需要用PBS洗培養(yǎng)板嗎?明膠對細(xì)胞有毒性嗎?明膠為什么能促進(jìn)細(xì)胞貼壁?還有什么辦法可以促進(jìn)細(xì)胞貼壁啊。 |

金蟲 (初入文壇)
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3樓: Originally posted by 百奧賽圖沈博 at 2013-01-22 18:59:58 最好長在mmc處理的MEF細(xì)胞上。如果一定不想用MEF,1%的Gelatin處理平皿也可以的。如果是用PBS溶的,不用洗。但注意gelatin處理的時候不要有蒸發(fā),否則鹽濃度太高,會影響細(xì)胞生長。 可以肯定地說,用MEF的話,對 ... 嗯,謝謝,我用的Gelatin就是用PBS溶的,下次試試1%的濃度。你說的MEF就是小鼠成纖維細(xì)胞吧,滋養(yǎng)層,可是我們實(shí)驗(yàn)室沒有足夠的滋養(yǎng)層細(xì)胞,無奈只能用明膠。 |

鐵蟲 (初入文壇)
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最好長在mmc處理的MEF細(xì)胞上。如果一定不想用MEF,1%的Gelatin處理平皿也可以的。如果是用PBS溶的,不用洗。但注意gelatin處理的時候不要有蒸發(fā),否則鹽濃度太高,會影響細(xì)胞生長。 可以肯定地說,用MEF的話,對ES細(xì)胞要好的多。如果有MEF,細(xì)胞會成丘狀,在Gelatin上長得話,細(xì)胞colony會長扁平。 |
金蟲 (初入文壇)

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