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bbhgchina鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
材料表面細(xì)胞活性怎么衡量
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各位兄弟姐妹們， （之前發(fā)信問(wèn)了幾個(gè)牛人同學(xué)，都沒(méi)有回，無(wú)意冒犯，但是這個(gè)問(wèn)題還比較急，現(xiàn)在卡著我，所以又發(fā)帖來(lái)咨詢(xún)一下）請(qǐng)教一下關(guān)于生物細(xì)胞試驗(yàn)的一個(gè)問(wèn)題，(非生物專(zhuān)業(yè)，只在網(wǎng)上搜索過(guò)MTT相關(guān)內(nèi)容）望不吝賜教。 我的目標(biāo)是觀(guān)測(cè)一種材料表面形態(tài)對(duì)細(xì)胞的影響。 初步設(shè)計(jì)的試驗(yàn)方案是在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組材料上面分別培養(yǎng)細(xì)胞，一定時(shí)間后（24h,48h,72h）對(duì)比兩邊細(xì)胞的差異。 現(xiàn)在的問(wèn)題是 由于不是生物專(zhuān)業(yè)，不知道用什么方法來(lái) 對(duì)比兩組細(xì)胞，甚至不知道培養(yǎng)何種細(xì)胞比較好。 我目前的想法是 1. 用電鏡直接觀(guān)看細(xì)胞形態(tài)變化 /粘附 2. 測(cè)量活細(xì)胞密度（不知道怎么測(cè)） 3. MTT 分析細(xì)胞活性 否麻煩大家給點(diǎn)建議 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
紅舟流星: 金幣+2, 專(zhuān)家考核, 歡迎來(lái)到生物功能材料板塊積極應(yīng)助交流 2013-01-24 04:34:02
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紅舟流星: 金幣+2, 專(zhuān)家考核, 歡迎來(lái)到生物功能材料板塊積極應(yīng)助交流 2013-01-24 04:34:02
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ATP analysis could be used to measured the loss in viability because a decrease in ATP production can be linked to a decrease in cell number. Specifically, ATP could be quantified by measuring the light produced through ATP's reaction with a naturally occurring firefly enzyme-Luciferase using a luminometer. The amount of light produced corresponds proportionally to the amount of live cells present in the sample. |
3樓2013-01-24 01:03:24
bbhgchina
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2樓2013-01-24 00:45:39
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【答案】應(yīng)助回帖
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markar: 金幣+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 感謝回帖交流！ 2013-01-25 12:23:20
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Are u using multipotent cells like hMSCs? if yes, you could try high-content imaging (see the proliferation) and immunofluorescence Staining (see the expression of alkaline phosphatase (ALP), a marker for early osteogenic differentiation) |
4樓2013-01-24 01:55:37
bbhgchina
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Thank you sir. So the name of this sort of analysis is ' the ATP analysis‘? Are these reactions you mentioned? luciferin + ATP → luciferyl adenylate + PPi luciferyl adenylate + O2 → oxyluciferin + AMP + light But, are these reaction happening in every type of cell like fibroblasts and epithelials, which are likely to be used in my experiments according to articles in this field. |
5樓2013-01-24 02:18:57
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