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budinggguodu金蟲 (初入文壇)
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[求助]
同源克隆 出條帶后測序結(jié)果很糾結(jié)
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我同源克隆后做了膠回收 然后連接轉(zhuǎn)化后測序 后來又拿膠回收產(chǎn)物又PCR了一次 再回收連接轉(zhuǎn)化測序 結(jié)果這兩次結(jié)果不一樣 并且都不是要的條帶 本人新蟲 想求助一下 我不會是挑了雜菌了吧。。�？墒蔷銹CR不管是M13還是特異的引物 都出來了很亮的條帶。糾結(jié)了 是不是本來引物就不好 擴出來的條帶就不是想要的目的條帶呢。。。唉 祝大家試驗順利。。 |
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cnliu51
金蟲 (小有名氣)
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2樓2013-01-26 06:18:01
cxt86
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
budinggguodu: 金幣+1, ★有幫助 2013-01-28 13:01:38
budinggguodu: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝你啦 測序結(jié)果確實有個反向的 可惜我反向試了試還是在NCBI里面找不到條帶很惆悵。。。準(zhǔn)備換個引物再試試吧 同源克隆好惆悵啊。。。祝你一切順利 2013-02-14 21:33:41
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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budinggguodu: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝你啦 測序結(jié)果確實有個反向的 可惜我反向試了試還是在NCBI里面找不到條帶很惆悵。。。準(zhǔn)備換個引物再試試吧 同源克隆好惆悵啊。。。祝你一切順利 2013-02-14 21:33:41
| LZ說的這個很亮的條帶是指什么？條帶大小和你預(yù)期的一樣嗎？M13是不是比特異引物稍稍長一點？如果樓主是新蟲，弱弱的問一下,是TA克隆嗎？那樣的測序結(jié)果沒有方向性，可能需要反向互補。希望對您有幫助。 |
3樓2013-01-27 04:32:04
budinggguodu
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不過 謝謝你 4樓2013-01-28 13:01:17
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