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zuihouyizhan金蟲 (小有名氣)
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[求助]
海洋細(xì)菌的抑菌試驗
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| 各位有沒有做海洋細(xì)菌抑菌試驗的，我用的紙片擴(kuò)散法，測了60多株都沒沒有，是發(fā)酵液太少還是什么，求指點(diǎn) |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zuihouyizhan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-01-28 11:19:22
laozuzunzhe: 金幣+5, good! 2013-01-28 19:29:36
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| 濾紙片法抑菌，如果直接用發(fā)酵液不進(jìn)行處理的話大多數(shù)情況下都很那出現(xiàn)理想的抑菌效果，主要是發(fā)酵液中的抑菌成分濃度太低，如果非要用濾紙片法可以把發(fā)酵液濃縮或者可以通過一些提取分離的方法把產(chǎn)物萃取出來再用濾紙片沾取含有產(chǎn)物的有機(jī)相后讓有機(jī)相蒸發(fā)進(jìn)行抑菌。另外的話，也可以直接將分離得到的純菌利用瓊脂柱法來篩選，這樣可以不需要發(fā)酵液就能獲得有抑菌效果的菌株，然后再進(jìn)行發(fā)酵分析其代謝產(chǎn)物的抑菌成分，篩選效率更高。 |
2樓2013-01-28 11:15:05
zuihouyizhan
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3樓2013-01-28 11:23:21
【答案】應(yīng)助回帖
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zuihouyizhan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-01-28 13:00:24
zuihouyizhan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-01-28 13:00:24
| 瓊脂柱法是一種高通量篩選，你要買到打孔器，有幾種規(guī)格的估計直徑1~2cm的就差不多。對分離得到的純菌涂布平板，當(dāng)長出單菌落（注意一定要是單個菌落不能讓菌落連成一片）后用滅好菌的打孔器將單個菌落打孔（同時可以用牙簽沾取少量每個瓊脂柱上的菌點(diǎn)種于另一個平板標(biāo)號作為備份），將整個菌落在你打下的瓊脂柱中間，再把瓊脂柱倒置在剛剛涂布好的指示菌上，排列整齊，蓋上蓋在蓋上進(jìn)行標(biāo)號，標(biāo)號與做備份的一致，最后培養(yǎng)箱培養(yǎng)。這樣只需要觀察培養(yǎng)后的指示菌的生長情況既可以判斷瓊脂柱上的單菌落是否對指示菌有拮抗作用。這種方法的篩選效率較高，建議篩選選用大平板。 |
4樓2013-01-28 12:06:40
zuihouyizhan
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5樓2013-01-28 12:23:58
6樓2013-01-28 12:37:34
zuihouyizhan
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7樓2013-01-28 12:55:32
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8樓2013-04-22 10:07:00
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