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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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greenygreen

銀蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
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專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)

[求助] HEK293A細(xì)胞怪異現(xiàn)象

HEK293A細(xì)胞，標(biāo)準(zhǔn)條件培養(yǎng)，傳代30代之內(nèi)。
昨天發(fā)現(xiàn)了一個(gè)奇怪的現(xiàn)象，傳代鋪板的時(shí)候都正常，轉(zhuǎn)染前的細(xì)胞形態(tài)也很好，轉(zhuǎn)染之后4小時(shí)加DMEM時(shí)候，細(xì)胞是應(yīng)激的偏圓形，直到24小時(shí)之后仍無法正常生長(zhǎng)，還是圓圓的，也不繁殖了。。。但是在大瓶子里養(yǎng)著的細(xì)胞都生長(zhǎng)的很正常。這是細(xì)胞老化的結(jié)果么？但是之前也有用30代左右的細(xì)胞，轉(zhuǎn)染好好的，24小時(shí)之后完全鋪滿了底面。求助有什么其他可能的原因？培養(yǎng)條件37度，5%二氧化碳，DMEM+10%FBS+1%雙抗。轉(zhuǎn)染試劑，lipo2000。

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1樓 2013-01-30 15:23:35

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shujunru

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 3 (幼兒園)
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蟲號(hào): 2058158
注冊(cè): 2012-10-13
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

你是用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的嗎？你轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒是不是采用無內(nèi)毒素的試劑盒抽提的？如果質(zhì)粒有內(nèi)毒素，細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變得很差，如果你用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，加雙抗了嗎？如果加了雙抗，恭喜你，細(xì)胞就會(huì)死個(gè)差不多。取仔細(xì)看看你所使用試劑的說明書，那玩意不是擺設(shè)。

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