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sunnyvit

銀蟲 (小有名氣)

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[求助] 基因突變

各位大俠幫忙看一下，我想突變一段基因的4個(gè)位點(diǎn)，是4個(gè)氨基酸且每個(gè)之間隔一個(gè)氨基酸，（ABCDEFGH其中BDFH氨基酸是我要突變的位點(diǎn)）我的目的基因序列全長(zhǎng)1000bp，突變區(qū)域在400bp左右，請(qǐng)問(wèn)該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)？除了突變區(qū)域的引物是否還需要起始端和終末端再各加一條引物呢？（我是在質(zhì)粒上做突變）。

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1樓 2013-02-01 10:33:37

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Haibara_Ai

銅蟲 (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
sunnyvit: 金幣+1, ★有幫助 2013-04-24 16:36:28

一共才21個(gè)bp  直接正反兩條引物PCR就行了，突變區(qū)域放在Forward primer的5’端，Reverse的3‘端
               5’ （--------------）------------------- 3’    F
  ------------------（--------------）                         R
括號(hào)里是mutation區(qū)域

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回復(fù)此樓

2樓2013-02-01 11:13:49