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T細(xì)胞培養(yǎng)需不需要加hygromycin B
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各位蟲(chóng)友， 本人剛接觸T細(xì)胞培養(yǎng)，所用T細(xì)胞需要先解凍再加入37C的RPMI1640中，按照以前師兄的protocol需要加hygromycin B，但是這是一種藥物，有可能會(huì)殺死細(xì)胞，又查了文獻(xiàn)說(shuō)剛解凍的細(xì)胞比較脆弱，不能加hygromycin B。請(qǐng)問(wèn)到底應(yīng)不應(yīng)該加��？細(xì)胞比較少，所以不敢輕易嘗試。 謝謝 |
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manyang1989
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2樓2013-02-14 13:18:01
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一般不需要啊。樓主培養(yǎng)的細(xì)胞比較少，多的話可以一部分做嘗試。 但本人做過(guò)T細(xì)胞培養(yǎng)，沒(méi)有加潮霉素，加了會(huì)破壞T細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。 |
3樓2013-02-14 15:06:11
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我們現(xiàn)在是先用RPMI1640和FBS先將解凍的細(xì)胞養(yǎng)2-3天，然后再加hygromycin，L-glutamine 和 penicillin-streptomycin。具體的Media配方如下： 500ml PPMI 1640（with phenol acid） 50 ml FBS(inavtivation) after the cell grows well, add 10 ml 1mg/ml hygromycin B add 2mM L-glutamine 和 penicillin-streptomycin. 您看這樣可以嗎？十分感謝  |
4樓2013-02-15 03:34:25
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