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樹蛙wagaa新蟲 (初入文壇)
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[交流]
用酶聯(lián)免疫斑點法檢驗人HLA2 Ⅰ抗體的新法
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目的:建立一種新的檢測人類HLA2 Ⅰ類抗體方法———酶聯(lián)免疫斑點法(ELISpot) 。 方法: 以鼠B 細胞系HB95 為模型,建立一系列特異性ELISpot檢測HLA2 Ⅰ類抗體的參數(shù),包括HLA 抗原的來源、包被抗體最適宜濃度的選擇、B 細胞最適宜孵化時間,同時以經(jīng)EBV 轉(zhuǎn)化的敏感NTP 患者B 細胞系為干擾因素,檢驗該方法的敏感性和特異性。 結(jié)果:以B 細胞溶胞體作為HLA抗原來源,當抗原濃度為0125 mg/ ml 時,相同細胞密度下所獲得的斑點頻數(shù)均高于其它三種抗原濃度(01125、 015 和110 mg/ ml , P < 0105) ;當包被抗體濃度為118 mg/ ml 、稀釋度為1∶125 時,相同孵育時間下所獲得的斑點頻數(shù)高于其它稀釋濃度(1∶250、1∶500 和1∶1 000 , P < 0105);且在抗體稀釋度相同情況下,B 細胞孵育時間為24 小時所獲得的斑點最清晰、背景著色最淺、最容易被分析儀器識別。此外,當同時加入經(jīng)EBV 轉(zhuǎn)化的人B 細胞時,所獲得的斑點頻數(shù)與單純加鼠B 細胞相似, 無明顯差異( P> 0105) 結(jié)論:當B 細胞溶胞體作為HLA 抗原且濃度為0125 mg/ ml、包被抗體濃度為118 mg/ ml 且稀釋度為1∶ 125、B 細胞孵育時間為24 小時時,該ELISpot 方法能特異地、敏感地、可信地檢測人HLA2 Ⅰ類抗體。 本文由探生科技技術(shù)人員提供，如果您想了解更多關(guān)于抗體的信息，可以訪問Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家查找相關(guān)資料,希望對您有幫助！ |
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