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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 尿囊液提取病毒
| 查看: 1202 | 回復(fù): 11 | ||
1989zb金蟲 (小有名氣)
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[求助]
尿囊液提取病毒
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| 在尿囊液中提取RNA病毒，選用什么試劑或者試劑盒效果好呢？？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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1989zb: 金幣+5 2013-03-06 09:15:23
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250ul病毒液+750ul Trizol，輕輕顛倒數(shù)次，混勻 加入200ul氯仿，顛倒混勻15次，冰浴5min（提前放在-20冰箱） 4℃ 13000rpm 15min 小心吸取上清，加入750ul新離心管，加入等量異丙醇（提前放在-20冰箱），顛倒混勻，冰浴10min 4℃ 13000rpm 15min 棄上清，加入1ml75%DEPC酒精（提前放在-20冰箱），4℃ 13000rpm 5min，棄上清，瞬離，黃槍頭吸凈上清，轉(zhuǎn)一周，瞬離，白槍頭吸凈。 風干，（5-10min），加入10ul 無RNA酶水，輕拍，轉(zhuǎn)動，瞬離， 反轉(zhuǎn)錄即可 （全程要盡可能避免核酸酶污染，帶手套，口罩，所用槍頭須是提RNA專用的） |
8樓2013-03-05 17:40:19
vetjacky
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2樓2013-02-25 14:57:17
1989zb
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7樓2013-03-05 08:36:04
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9樓2013-03-06 09:16:47
10樓2013-03-06 15:31:59
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