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nickey910木蟲(chóng)之王 (職業(yè)作家)
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怎樣保證離體大鼠腦組織中ATP不被分解？
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各位戰(zhàn)友，有誰(shuí)做過(guò)腦缺血再灌注試驗(yàn)，離體腦組織中ATP的液相含量測(cè)定，怎樣保證離體大鼠腦組織中ATP不被分解，現(xiàn)在我用的樣品處理方法是取0.3g腦組織，立即用0.5mol/L高氯酸溶液2ml在冰水浴充分勻漿靜置10min，0~4℃以3000rpm離心10min，取上清加入0.5mol/L氫氧化鉀調(diào)ph為6.5，再以10000rpm離心10min，取上清進(jìn)樣走液相。液相色譜條件為色譜柱Hypersil ODS C18 250mm*4.6mm，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，流動(dòng)相A：70mmol/L磷酸二氫鈉+3mmol/L四丁基溴化銨（調(diào)ph6.5），流動(dòng)相B：甲醇。A:B=90:10，流速1ml/min。 現(xiàn)在的問(wèn)題是對(duì)照品出峰順序?yàn)锳MP 7.3min，ADP 14.4min，ATP 27.2min，分離效果挺好，但是樣品中的ADP和ATP檢測(cè)不出來(lái)，基線就是平的，很郁悶，不知是哪里出了問(wèn)題，是ATP分解了嗎，還是別的原因，請(qǐng)幫忙分析一下，非常感謝 |
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2樓2013-03-05 19:48:29
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3樓2013-03-06 09:41:55
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4樓2013-03-08 07:55:47
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5樓2013-03-11 11:18:34
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6樓2013-03-12 08:36:43
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7樓2013-03-13 13:52:40
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9樓2013-03-18 09:06:17
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10樓2013-09-30 12:09:49
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