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怎樣保證離體大鼠腦組織中ATP不被分解？
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各位戰(zhàn)友，有誰做過腦缺血再灌注試驗，離體腦組織中ATP的液相含量測定，怎樣保證離體大鼠腦組織中ATP不被分解，現(xiàn)在我用的樣品處理方法是取0.3g腦組織，立即用0.5mol/L高氯酸溶液2ml在冰水浴充分勻漿靜置10min，0~4℃以3000rpm離心10min，取上清加入0.5mol/L氫氧化鉀調(diào)ph為6.5，再以10000rpm離心10min，取上清進樣走液相。液相色譜條件為色譜柱Hypersil ODS C18 250mm*4.6mm，柱溫40℃，檢測波長254nm，流動相A：70mmol/L磷酸二氫鈉+3mmol/L四丁基溴化銨（調(diào)ph6.5），流動相B：甲醇。A:B=90:10，流速1ml/min。 現(xiàn)在的問題是對照品出峰順序為AMP 7.3min，ADP 14.4min，ATP 27.2min，分離效果挺好，但是樣品中的ADP和ATP檢測不出來，基線就是平的，很郁悶，不知是哪里出了問題，是ATP分解了嗎，還是別的原因，請幫忙分析一下，非常感謝 |
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